造血干细胞检测试剂盒(流式细胞仪法)
--国际公认的造血干细胞最精确的检查方法，干细胞采集不佳的最可靠预测指标
样本类型：
校准品：请根据所用流式细胞仪型号选用厂家要求配套的校准品
质控品：请根据所用流式细胞仪型号选用厂家推荐的质控品
配套仪器：中生BioCyte、FlowCyte/ZS-AE7S、FACSCantoII、FACSCalibur、DxFLEX、Navios、NovoCyte、BriCyte E6等流式细胞仪
指标简介
造血干细胞（Hematopoietic Stem Cell，HSC）主要来源于骨髓、脐带血和外周血，具有自我更新、多向分化潜能、归巢潜能以及可塑性等特点，是发现最早、研究历史最长、临床应用最为广泛的干细胞。临床上通过造血干细胞移植（Hematopoietic Stem Cell Transplantation，HSCT）可帮助患者恢复造血功能，重建免疫系统。目前，HSC已在血液系统疾病、自身免疫疾病、某些实体瘤和基因缺陷疾病等多种疾病治疗中显示出巨大潜力。干细胞治疗中在样品采集、细胞分离与富集、细胞冻存与冷链运输、体外培养与扩增、细胞回输等多个环节均涉及到细胞绝对计数，准确的HSC计数对于HSCT的成败十分重要。在实验和应用领域，会把特异性高表达CD34的细胞归类于HSC，流式细胞仪结合荧光单抗技术为HSC绝对计数提供了一种快速、定量、重复性好的方法，是目前国际公认的造血干细胞最精确的检查方法。
检测原理
流式细胞仪法：待测样本的细胞悬液，在鞘液的包围和约束下，细胞排成单列高速由流动室喷嘴喷出，形成细胞液柱。当液柱通过检测区，在入射的激光束照射下产生前向角散射光（FSC）和侧向角散射光（SSC），它们分别反映细胞大小和颗粒度，根据这些特性可以将细胞分类。经一种或几种特殊荧光标记的样本，在激光束的激发下所产生的特定荧光，可被光学系统检测并输送到计算机进行分析，得到细胞相应的各种特性。
临床应用
- 各种造血干细胞移植物的CD34+细胞剂量控制：BMT和PBSCT的CD34+细胞剂量>2×106/kg;脐血干细胞移植时，CD34+细胞剂量可少至BMT或者PBSCT的1/10，即2×106/kg。
- 化疗强弱的掌握：化疗后血象的恢复快慢取决于对造血干/祖细胞损伤的强度。CD34+细胞的测定可以判断化疗的强度，即要求化疗强度控制在杀伤一定比例而非所有CD34+细胞。
- 贫血的鉴别(如再生障碍性贫血、缺铁性贫血)：如果再障的原因属于细胞受累，则CD34+细胞可以明显降低(<0.01%)，缺铁性贫血时，CD34+细胞数量应在正常范围之内。
- 基因治疗CD34+的HSC作为缺陷基因的靶细胞有它独特的优点，因为HSC具有自我更新的能力，因此，缺陷基因导入此类细胞后能维持终身，从而彻底治愈疾病。治疗过程中CD34+HSC的精确测定非常重要。
- 外周血造血干细胞(PBSC)采集前CD34阳性细胞动员有效性的监测可以指导临床制定采集计划。如外周静脉血有核细胞中CD34+细胞达到0.001(0.10%)以上时，可以考虑行PBSC单采术。否则，应继续动员。
适用科室
血液科、肿瘤科等。
参考文献
[1] 中国免疫学会血液免疫分会临床流式细胞术学组. CD34阳性细胞绝对计数的流式细胞术测定指南[J]. 中华血液学杂志,2015,36(7):539-546.
[2] 中华医学会血液学分会,中国临床肿瘤学会(CSCO)抗淋巴瘤联盟. 淋巴瘤自体造血干细胞动员和采集中国专家共识(2020年版)[J]. 中华血液学杂志,2020,41(12):979-983.
[3] 中华医学会血液学分会造血干细胞应用学组. 成人急性白血病自体造血干细胞移植中国专家共识(2024年版)[J]. 中华血液学杂志,2024,45(7):637-644.>
指南共识
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序号 |
指南/共识名称 |
要点 |
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1 |
《CD34阳性细胞绝对计数的流式细胞术测定指南》（2015） |
20世纪80年代，CD34分子在造血祖细胞上表达的发现，为临床HSCT提供了可评估植入最低阈值的强有力工具。大量的临床研究证实用富含CD34细胞组分移植可安全、持久地获得多系造血重建。因此，目前临床及实验室仍然是应用CD34细胞进行HSCT、基因转染和HPC扩增，而流式细胞术计数CD34*细胞因具有快速、简便、可定量等特点，已广泛应用于移植物中HSC/HPC数量的检测及确定采集时机等。 |
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2 |
《淋巴瘤自体造血干细胞动员和采集中国专家共识（2020年版）》 |
研究显示采集前的外周血CD34+细胞计数和最终干细胞采集量之间存在线性关系，因此被认为是干细胞采集不佳的最可靠预测指标。建议有条件的单位在采集前检测外周血CD34+细胞计数以识别动员不佳的患者。 |
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3 |
《成人急性白血病自体造血干细胞移植中国专家共识（2024年版）》 |
外周血干细胞动员阶段，推荐在造血恢复期每日监测外周血白细胞和CD34+细胞计数，白细胞计数恢复至>5×109L或外周血CD34+细胞>0.02×109L时采集外周造血干细胞。 |
