精准评估免疫杀伤功能 | 中生CTL/NK细胞杀伤力检测,助力临床精准诊疗
发布时间:
2026-06-08 16:26
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免疫杀伤功能是机体抵御病毒感染、监视肿瘤发生、清除异常细胞的核心防御屏障。仅检测淋巴细胞数量,早已无法满足精准医疗需求 ——数量正常、功能低下的误判,往往导致肿瘤、重症感染、移植排斥等疾病的诊疗偏差。
为破解这一临床痛点,中生医疗重磅推出CTL/NK 细胞杀伤力(穿孔素 + 颗粒酶 B)流式检测项目,以单细胞水平精准量化免疫杀伤活性,为临床提供从 “数量检测” 到 “功能评估” 的关键解决方案,赋能全场景免疫功能精准管理。
01
穿孔素与颗粒酶B生物学基础
免疫杀伤的核心效应细胞为CTL 细胞(CD3⁺CD8⁺T 细胞)与NK 细胞(CD3⁻CD16⁺CD56⁺),二者协同清除异常细胞的关键,依赖穿孔素与颗粒酶B的精准配合:
穿孔素(Perforin):分子量约67kDa的糖蛋白,主要由激活的CD8+T细胞与NK细胞合成,储存于细胞毒颗粒中。静息状态下表达水平极低,免疫激活后表达量显著升高。在Ca2+参与下,穿孔素可在靶细胞膜上聚合形成跨膜孔道,破坏细胞膜完整性,为颗粒酶B进入靶细胞提供关键通路,是启动细胞毒杀伤的必需分子。
颗粒酶B(Granzyme B):丝氨酸蛋白酶家族中最重要的效应分子,与穿孔素共定位储存于细胞毒颗粒内。在穿孔素形成孔道后,颗粒酶B进入靶细胞胞质,激活Caspase 凋亡级联反应,快速诱导靶细胞发生程序性死亡,是执行杀伤效应的核心功能分子。
穿孔素与颗粒酶B协同杀伤机制:CTL与NK细胞识别靶细胞后形成免疫突触,释放细胞毒颗粒;穿孔素在靶细胞膜上聚合形成孔道;颗粒酶B经孔道进入靶细胞内部;颗粒酶B激活凋亡通路,最终导致靶细胞凋亡。该机制是机体清除病毒感染细胞、肿瘤细胞及介导移植排斥的主要途径。

图1:细胞毒性淋巴细胞与靶细胞的相互作用过程[1]
细胞毒性淋巴细胞识别其靶细胞后,形成免疫突触(图a)。随后,细胞毒性淋巴细胞的微管组织中心(MTOC)发生极化,分泌颗粒向突触前膜移动(图b)。这些分泌颗粒与突触前膜融合,将穿孔素和颗粒酶释放到突触间隙中(图c和d)。在突触后膜处,穿孔素形成大型跨膜孔道,使颗粒酶能够扩散进入靶细胞胞质。颗粒酶随后启动靶细胞的凋亡过程;细胞毒性淋巴细胞随即从死亡细胞上脱离(箭头所示;图e),并可与另一靶细胞相互作用,实现连续杀伤效应。
02
CTL/NK细胞杀伤力检测的临床价值
作为免疫功能评估的 “金标准” 指标,穿孔素与颗粒酶 B检测已被多项权威共识认可,覆盖肿瘤、感染、移植、自免疾病、免疫缺陷等多种应用场景:
肿瘤诊疗中的应用
肿瘤患者中,穿孔素与颗粒酶B表达水平可反映机体抗肿瘤免疫能力。乳腺癌等恶性肿瘤患者外周血CTL与NK细胞中穿孔素、颗粒酶B阳性率显著高于良性疾病对照组,可用于良恶性辅助鉴别。其表达水平与肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移呈正相关,可用于病情评估。治疗有效者表达水平显著回升,持续降低提示疗效不佳、复发风险增高,可指导免疫治疗方案选择[2]。
感染中的应用
病毒感染急性期,CTL与NK细胞活化,穿孔素、颗粒酶B表达升高;重症或慢性感染阶段,杀伤功能受抑制,表达下降[3]。在儿童脓毒症中,pSOFA评分越高,穿孔素与颗粒酶B表达越低,提示免疫抑制明显,预后差[4]。动态监测可判断病情严重程度、预测转归,并指导抗感染与免疫调节治疗。
器官移植排斥监测
在肾移植、造血干细胞移植中,急性排斥发生前 3 天即可出现穿孔素、颗粒酶 B 显著升高,早于临床症状与实验室指标异常,可实现无创、早期、精准预警。表达水平与排斥病理分级呈正相关,可评估排斥严重程度。抗排斥治疗有效后指标快速下降,持续高水平提示治疗失败,可指导临床及时调整方案[5,6]。
自身免疫性疾病评估
系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等自身免疫病活动期,CTL与NK细胞杀伤功能异常增强,穿孔素、颗粒酶B表达升高;病情缓解后表达下降。可用于判断疾病活动度、监测药物疗效、指导免疫抑制剂使用。
免疫缺陷与健康体检评估
穿孔素基因突变可导致家族性噬血细胞性淋巴组织细胞增生症等原发性免疫缺陷病,检测可快速明确诊断。在健康体检中,可评估机体免疫杀伤储备功能,早期预警肿瘤易感、反复感染等风险,实现免疫功能的全面评估。
03
中生CTL/NK细胞杀伤力检测试剂盒

检测项目 | 荧光标记 | 用途 |
CD45 | PerCP | 白细胞设门 |
CD3 | PE-Cy7 | T细胞设门 |
CD8 | APC-Cy7 | CTL(CD8+T)设门 |
CD56 | APC | NK细胞设门 |
颗粒酶B | FITC | 细胞内杀伤功能分子 |
穿孔素 | PE | 细胞内杀伤功能分子 |

中生流式实测图
参考文献
[1] VOSKOBOINIK I, WHISSTOCK J C, TRAPANI J A. Perforin and granzymes: function, dysfunction and human pathology[J]. Nature Reviews Immunology, 2015, 15(6): 388-400.
[2] 庄赵为,袁武梅,任作东,等。乳腺癌患者外周血中颗粒酶 B 和穿孔素的表达及意义[J]. 实用医学杂志,2023, 39 (22): 2872-2877.
[3] 姜涛,欧阳文献,谭艳芳,等. EV71手足口病患儿CD8+T、NK细胞穿孔素和颗粒酶B的变化[J]. 中国感染控制杂志,2018, 17 (12): 1079-1082.
[4] 魏晓星,赵明奇,郭巧芝,等。外周血淋巴细胞亚群及细胞内颗粒酶 B 和穿孔素在儿童脓毒症中的变化 [J]. 中国循证儿科杂志,2025, 20 (5): 385-390.
[5] 丁小明,刘晓东,田普训,等。穿孔素和颗粒酶B的表达与肾移植术后急性排斥反应的关系[J]. 中华器官移植杂志,2005, 26 (6): 344-346.
[6] 杨帆,陈虎,刘代红,等。造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病发生与颗粒酶 B、穿孔素及FasL基因表达的相关性[J]. 中华血液学杂志,2006, 27 (4): 264-268.
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